紫外可見分光光度計的工作原理： 由光源燈發出連續輻射光線，經濾光片和球面反射鏡至單色器的入射狹縫聚焦成像，光束通過入射狹縫經平面反射鏡到準直鏡產生平行光，射至光柵上色散后又以準直鏡聚焦在出射狹縫上形成一連續光譜，由出射狹縫選擇射出一定波長的單色光，經聚光鏡聚光后，通過試樣室中的測試溶液部分吸收后，光經光門再照射到光電管上。調整儀器，再移動試樣架拉手，使同一單色光通過測試溶液后照射到光電管上。如果被測樣品有光吸收現象，光量減弱放大器處理，將光能的變化程度通過數字顯示器顯示出來。可根據需要直接在數字顯示器上讀取透光度，吸光度或濃度。
紫外可見分光光度計的波長選擇：
需從光源發出的寬波長中選擇適合用于檢測的樣品類型和分析物的特定波長的光進行樣品檢查。常用的方法包括：
干涉濾光片
也稱為二向色濾光片，這些常用的濾光片由多層介電材料制成，其中在薄層材料之間發生干涉。這些濾光片可用于通過相消干涉消除不需要的波長，從而充當波長選擇器。
截止濾光片
截止濾光片允許低于（短波）或高于（長波）特定波長的光通過。這些通常使用干涉濾波器來實現。
單色器
單色器將光分成窄的波長帶。它通常基于可以旋轉的衍射光柵來選擇入射角和反射角，從而選擇所需的光波長。衍射光柵的凹槽頻率通常以每毫米的凹槽數來衡量。更高的凹槽頻率提供更好的光學分辨率，但可用波長范圍更窄。較低的凹槽頻率提供較大的可用波長范圍，但光學分辨率較差。每毫米300到2000個凹槽可用于紫外可見光譜目的，但通常每毫米至少有1200個凹槽。光譜測量的質量對衍射光柵和光學裝置中的物理缺陷很敏感。因此，刻劃衍射光柵往往比閃耀全息衍射光柵具有更多的缺陷。閃耀全息衍射光柵往往能提供明顯更好的測量質量。
吸收濾光片
吸收濾光片通常由有色玻璃或塑料制成，旨在吸收特定波長的光。
帶通濾波器
帶通濾波器允許一系列波長通過，這可以通過將短波和長波濾波器組合在一起來實現。
由于其多功能性，單色儀常用于該過程。然而，濾光片通常與單色器一起使用，以縮小選擇的光波長以進行更精確的測量并提高信噪比。
